在內分泌六項檢查中，檢查的項目不同，注重方法也不同。
檢查的內容可以全查，也可以單項檢查，但目前許多的醫院是全項檢查。檢查睪酮，是抽取靜脈血清2毫升，常用的方法是放射免疫法，分離血清后即可測定;檢查雌激素(雌二醇)、孕激素、卵泡刺激素，也是靜脈血清分離后檢查，分別需要2毫升;檢查黃體生成素，雖然同樣是放射免疫法檢查，但由于黃體生成素是脈沖式分泌，標本采集好在1小時內采集3-4次，然后混合一起進行測定，這樣更加準確;泌乳素應該空腹檢查，在早上9點鐘左右抽取血清。
為了檢查準確，在檢查之前不可服用性激素類的藥物，假如服用，應該在激素徹底排泄之后檢查，以免發生誤診。
