影響酶促反應速度因素較為復雜，多種因素相關。影響酶促反應速度通常跟PH值有較大關系，當酶促反應速度達到最大時的反應體系的pH稱為酶的最適pH，pH低于或高于最適值，酶促反應速度均會降低。其次，溫度達到最大時的環境溫度稱為酶的最適溫度，高于或低于最適溫度，酶促反應速度均降低，一般人體內各種酶的最適溫度在37℃左右。另外，酶濃度、底物濃度均會影響酶促反應速度。日常做此項實驗室，需要保證各項數據在理論范圍之內。