1.雌激素試驗

　　孕激素試驗陰性者可以行雌激素試驗，以確定孕激素試驗陰性原因是否為雌激素水平低下。

　　方法

　　口服己烯雌酚1mg/d，共20天，停藥后陰道出血為Ⅱ度閉經，表明體內雌激素水平低下。其病因在卵巢、垂體或下丘腦功能不良。若做GnRH垂體興奮試驗后陰道無出血，則可明確子宮性閉經。

　　2.孕激素試驗

　　判斷卵巢有無雌激素分泌可行孕激素試驗。

　　方法

　　每天肌肉注射黃體酮20mg，用3天，或每天肌內注射10mg，用5天;亦可每天口服甲地孕酮5mg，用5天。

　　若停藥后3～7天出現陰道出血，表明該婦女體內有一定的雌激素，為Ⅰ度閉經;若無出血則為陰性，可能因為體內雌激素水平極低、子宮內膜增生不良，子宮內膜被破壞或缺如(如嚴重子宮內膜結核病、宮腔粘連或幼稚型子宮等)。

　　3.FSH、LH、PRL測定

　　適當時測定血中的各種激素水平，可獲得卵巢的功能狀態及其影響環節等方面較多的信息，檢測血清中FSH、LH、PRL、E2可以鑒別卵巢或垂體性排卵障礙于閉經。如確定卵巢是否已喪失分泌雌激素的能力，或因缺乏促性腺激素而卵巢不分泌甾體激素。用放射免疫法測定促性腺激素，按血清FSH、LH、PRL、E2值來鑒別卵巢或垂體性排卵障礙與閉經(表1)。

　　(1)PRL

　　正常值為0～20μg/L，PRL>25μg/L，而FSH/LH水平低，則屬高催乳素血癥(hyperprolactinemia)，PRL升高時應進一步作頭顱X線攝片或CT檢查，排除垂體腫瘤。

　　(2)月經周期中FSH正常值為5～20U/L，LH為5～25U/L

　　①FSH、LH值>40U/L，可能的情況有：卵巢功能障礙，卵巢早衰，或卵巢發育不全，卵巢不敏感綜合征，分泌促性腺激素的腫瘤，17-羥化酶缺乏引起的原發性閉經等。對原發性閉經患者，應作染色體核型分析及分帶檢查。

　　②LH>25U/L而FSH值正常、E2偏高或正常，特別是LH/FSH>3時，則可能為多囊卵巢綜合征，這時測定雄激素可發現雄烯二酮常上升。

　　③FSH，LH均<5U/L，示垂體功能減退，病變可能在垂體或下丘腦，而垂體與下丘腦病變的區別，需借助GnRH試驗，如結果不明確，則做蝶鞍多向斷層攝片或CT檢查有無異常，多向斷層攝片異常時進行眼底檢查。

　　4.GnRH垂體興奮試驗

　　GnRH垂體興奮即LHRH試驗，它可以區別下丘腦或垂體性閉經，提示GnRH治療反應。

　　方法

　　3ml生理鹽水加入50μg 10肽GnRH靜脈推注。分別取注射前后15，30，60和120min的血清測LH。LH峰值出現在用藥后15～30min，峰值出現在用藥后15～30min且絕對值增加7.5μg/L以上或LH較用藥前增高3倍以上為正常反應，垂體功能良好;峰值出現在用藥后60～90min為延遲反應;若LH基值低，在6μg/L以下，用藥后增加值低于基值2倍為低反應。