眼科專家為了使病毒性角膜炎的診斷更加的準確，就此進行了多次的試驗，得出了更能進一步確診的實驗室診斷法。
1、熒光抗體染色技術
取病變區的感染細胞或房水細胞，直接用熒光抗體染色檢查，在被感染的細胞漿或細胞核內可以找到特異的顆粒熒光染色，能在1～2小時作出快速診斷。由于標記熒光抗體有型的特異性，故在熒光顯微鏡下還可區分出Ⅰ型或Ⅱ型病毒。
2、病毒分離
是本病最可靠的病因診斷，采用的方法有：
?、傩∈竽X內接種
最敏感。小白鼠在2～3天內患皰疹性腦炎死亡。
②雞胚絨毛尿囊膜接種
Hela、VERO、FL、Hepz等各種傳代細胞培養，均適于皰疹病毒繁殖，24～48小時發生細胞病變，出現明顯的腫脹圓細胞灶。
3、刮取物接種兔角膜
有一定診斷價值，但經濟代價較高。
4、細胞學檢查 取角膜
結膜或眼瞼水泡的刮取物作HE染色檢查可發現有多核巨細胞，核內包涵體及風般樣上皮細胞。此法僅能證實病毒感染，而不能區分是否HSV感染。
5、電鏡檢查
可在感染的細胞內查到病毒顆粒。本法快速簡便，但不能與帶狀皰疹病毒相區別。
6、血清學檢查
取急性期及恢復期雙份血清作中和抗體效價的測定，若上升4倍以上即可確診。本法僅適用于原發感染者，繼發感染者在發病前血中已有較高的中和抗體，故臨床應用價值不大。